为确保产品的性能和无忧的操作，使用前请仔细阅读本手册，有任何疑问请咨询本公司售后技术支持或当地的销售人员（联系方式见附录）。

1.产品介绍

Focurose 6FF适用于生物大分子物质的组分分离和中度纯化（去除小分子杂质），例如：病毒颗粒、大分子蛋白、超螺旋DNA、多糖及大分子复合物。

特点：

a.高（理化）稳定性、高流速（组分分离）、高回收率（可高达95%）。

b.温和的洗脱条件可以完整的保留生物大分子生物学活性和功能。

c.易于放大。

d.易于维护。

表1：性能参数

2.溶液制备

洗脱液：根据客户需求进行配制。

备注：建议在目标溶液中加入一定浓度的盐（至少0.025 M）用来抑制样本和介质的离子作用。

3.样品制备

3.1浓缩样品上样前过滤（平均粒径<45µm，用0.22µm过滤；45µm<平均粒径<165µm，用0.45µm过滤；平均粒径>165µm，用   0.8µm过滤）。

4.纯化流程（以装填XK 16/70的柱子为例 ）

4.1清洗

取140g的沉降介质，加入3倍体积的纯化水重悬后用G3砂芯漏斗抽干，重复此步骤两次。

4.2匀浆

将清洗完的抽干的介质用相同体积(≈140ml)的纯化水进行重悬，用玻璃棒缓慢搅拌均匀。

4.3准备柱子

a.将柱管、下柱头、适配器以及装柱器用纯化水冲洗干净；

b.安装下柱头后拧紧密封圈；

c.注入3-5cm高的纯化水；

d.拧下下堵头，待排出所有气泡后再拧上下堵头；

e.安装装柱器，将层析柱垂直固定在层析系统附近。

4.4脱气

   将匀浆后的介质用真空泵或超声清洗装置进行脱气。

4.5装柱

a. 将脱气后的介质用玻璃棒或其它搅拌装置温和搅拌均匀后，快速、连续加入（用玻璃棒引流，避免引入气       泡）到层析柱中。

b. 快速用纯化水将装柱器上端填满，并装上装柱器盖。

c. 用管路连接层析系统和装柱器后，拧下下堵头，以3ml/min(90cm/h)的流速压柱120min后暂停层析系统。

d. 拧上下堵头，快速取下装柱器，用纯化水填满柱管。

e. 将适配器连接层析系统，待管路中气泡排尽后，将适配器稍微倾斜后插入柱管至介质界面上端0.5-1cm，拧紧密封圈。

f. 拧下下堵头，以6ml/min(180cm/h)的流速压柱30min后停止层析系统。

g. 标记介质界面刻度，将适配器压至介质界面以下0.3cm。

4.6柱效检测

a. 连接层析柱出口至层析系统，用纯化水以1ml/min(30cm/h)的流速平衡2CV(柱体积)；

b. 用定量环或上样泵注入1%CV的2%丙酮；

c. 以1ml/min(30cm/h)的流速运行1.5CV；

d. 计算HETP和As，HETP≤3h（h为平均粒径）且0.7≤As≤1.3方为合格，否则重装。

4.7使用

      若柱效检测合格可立即使用，以1ml/min(30cm/min)的流速用平衡液（平衡液中加入0.15M氯化钠，抑制可能存在的非特异性吸附）平衡2CV后进行进样（建议上样体积≤2.5%CV）分离；若柱效检测合格后，以1ml/min(30cm/min)的流速用保存液平衡2CV后保存。

5.清洗（以装填XK 16/70的柱子为例 ）

5.1 用纯化水以1ml/min（30cm/h）冲洗2个CV。

5.2  用1.0M NaOH以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

5.3 用纯化水以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

5.4 用1.0M 乙酸以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。。

5.5 用纯化水以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

5.6 用70%乙醇以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

5.7 用纯化水以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

5.8 用20%乙醇以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

6.消毒

6.1 用纯化水以1ml/min（30cm/h）冲洗2个CV。

6.2 用1.0M NaOH以1ml/min（30cm/h）的流速反向冲洗2个CV。

6.3 用纯化水以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

6.4 用20%乙醇以1ml/min（30cm/h）的流速冲洗2个CV。

7.常见问题

表2：常见问题及解决方案

8.订购信息

表3：订购信息表

备注：大规格包装产品或其它产品购买，请咨询本公司当地销售或售前技术支持。